merry70

:em27: 请问怎样才能使冰冻切片染得更清晰？

奇刺

有一个多处违反原则，但是效果还可以的方法，看你敢不敢用了。
1、切片
2、酒精灯外焰直接加热2秒，然后快速移开1秒，再次加热，再移开；以此循环7-10秒后，入4度丙酮4分钟。
3、水洗30秒
4入苏木素常规染色。

奇刺

对临床快速切片有帮助，我是听来的，可是从来没敢试过，也许你敢试试

dingwei

引用:

下面引用由奇刺在 2002/02/27 06:57pm 发表的内容：
有一个多处违反原则，但是效果还可以的方法，看你敢不敢用了。
1、切片
2、酒精灯外焰直接加热2秒，然后快速移开1秒，再次加热，再移开；以此循环7-10秒后，入4度丙酮4分钟。
3、水洗30秒
...

这不是好办法，我们最早时就是这样做的，细胞核变成毛玻璃样。要想冰冻切片染得好，关键是要看你的操作，我希望你能把整个过程写一下，看看问题出在什么地方。

merry70

谢谢！我只能先试一试。

merry70

1.切片2.煤气上烘干3.苏木，水洗4.盐酸酒精分化，水洗，擦干5.酒精脱水6.二甲苯透明7.封片。

dingwei

我想你们的问题主要在固定上：
1、切出的片子用载玻片贴附后立即放入甲醇中固定，固定时间为10～20秒 。绝对不能干燥或用火烤后再固定。
2、苏木素1分钟
3、水洗
4、盐酸酒精分化1秒钟
5、水洗
6、温水蓝化
7、伊红2～5秒钟
8、梯度酒精快速脱水，二甲苯透明，中性树胶封固。
   你可以做一下对比，看看是否有区别。