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求助:改良Gomori三色染色方法

求助:改良Gomori三色染色方法

紧急求助,大家好!我用改良Gomori三色染色方法:方法1
Gomori液(铬变素2R 0.6克、FCF固绿 0.3克、磷钨酸 0.8克、冰醋酸 1ml、蒸馏水100ml)、0.5%冰醋酸(冰醋酸0.5ml、蒸馏水99.5ml)、Bouin固定液(苦味酸饱和液75ml、甲醛40%原液25ml、冰醋酸5ml)、铁苏木精: 溶液A(苏木精1克、95%酒精100ml) 溶液B(蒸馏水237.5ml、盐酸2.5ml、29%三氯化铁10ml)工作液:A与B液等量混合。
步骤:1脱腊至水,蒸馏水冲洗 2 Bouin试剂56度1小时 3 自然放冷,在流水中使黄色消失 4 铁苏木10分钟,流水冲洗10分钟 5 Gomori染 15~20分钟 6 0.5%冰醋酸分化2分钟。7 脱水、透明、封片(树胶)
结果:细胞核黑色、 肌肉红色、胶原粘液绿色。
方法2 染色步骤:
1.Harris苏木精10分钟 2.流水冲洗 10分钟 3.Gomori氏溶液30分钟 4.0.2%醋酸浸洗10~15分钟 5.酒精脱水,二甲苯透明,树胶封固。
我用方法2结果肌肉还是红色的。和线粒体的颜色就不能区分了!!正常结果应该是:核紫红,肌纤维暗绿色,胶原亮绿色 ,线粒体红色。请问各位前辈这是什么原因,我的方法出了什么问题!!!谢谢了!!!

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