刚开始做免疫组化加PAS双染，但是却不尽人意，始终没有结果，我把步骤写在这边，希望高手指点迷津
切片脱蜡至水 二甲苯一10min，二甲苯二10min，100%酒精5min，90%酒精5min，80%酒精5min，70%酒精5min，两道蒸馏水各三分钟，
免疫组化步骤按北京中山金桥pv8000说明
1、脱蜡、水化组织切片。
2、根据所应用的一抗的特殊要求，对组织切片进行预处理。
3、3% H2O2去离子水孵育5分钟，以阻断内源性过氧化物酶，PBS或TBS冲洗。
4、滴加一抗，室温或37℃孵育30~60分钟，或4℃过夜，PBS或TBS冲洗，2分钟×3。
5、滴加通用型IgG抗体（Fab段）-HRP多聚体，室温或37℃孵育30分钟，PBS或TBS冲洗，2分钟×3。
6、应用DAB溶液显色。
7、显色后
高碘酸溶液10min
蒸馏水充分漂洗3min*2
希夫试剂，避光室温，15min
流水冲5min，
苏木精复染
梯度乙醇脱水
二甲苯透明．树脂封片
这么做就是染不上颜色，免疫组化还勉强有点棕色但切片中间没棕色反应物，pas压根就一点没红色，大虾们看看我哪里出问题了
Schiff试剂（配制20m1）：
称取碱性品红0.1g，烧杯内放入20ml蒸馏水，煮沸，将0.lg碱性品红慢慢到人沸水中，边放边搅，至完全溶解。待温度降至60～70℃时过滤至锥形瓶中，加2ml1NHCl于瓶中，摇匀。加入Na2SO3 0.2g于瓶中，塞紧瓶口，摇荡至完全溶解，用黑纸将瓶包严置阴暗处过夜。次日加100mg活性炭于瓶中，摇匀后迅速过滤于棕色瓶内。保存于4℃冰箱中备用
先在这里谢谢了
现在我买上sigma的Schiff试剂了，只做pas染色，但是还是没什么效果，还请高手帮忙看看是哪里出问题了，我的脱蜡至水有问题吗还是什么，我已经做了还多次了但结果不尽人意啊，谢谢了！
