fydapg

伊红染色不太好，该如何解决？各位大侠：

       我做的是小鼠胚胎脑组织切片！
      我用的伊红配方是沉淀酸化伊红Y乙醇液，但是最后封片观察发现，伊红染色特别淡，请大家帮助解决，谢谢！我的切片浸入伊红染液的上一步是在95%乙醇浸泡3分钟。下面是我染色的详细时间步骤，各位老师能否帮我修正一下。
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二甲苯1-------------------------8 min
二甲苯2-------------------------8 min
无水乙醇------------------------2 min
95%乙醇-------------------------2 min
75%乙醇-------------------------2 min
自来水洗
苏木精浸染----------------------5——10 min   Gill改良苏木素液
自来水洗
1%盐酸乙醇分化---------------数秒     
自来水洗                                    
50℃温水蓝化-------------------1 min
自来水洗
95%乙醇-------------------------3 min
伊红染色-------------------------3——10秒   沉淀酸化伊红Y乙醇液
自来水洗
脱水——透明——封固：
95%乙醇--------------------- 2秒
无水乙醇-------------------- 5秒
无水乙醇--------------------3~5秒
无水乙醇--------------------1min
二甲苯1---------------------5 min
二甲苯2---------------------5 min
中性树胶封固、晾干（制片流程结束）

   封片后，我最后发现伊红染的很淡，苏木精染的还可以；
还有切片从伊红染液里出来后，要不要经过水洗这一步骤？还有我这染色步骤有没有哪地方需要改动的？

hb19880803

个人觉得是伊红的时间短了，一般我是浸染1到2分钟的，你可以试下看看效果。

hb19880803

还有就是伊红出来不要水洗的。

czs000

伊红的时间段啦！1-3秒除非你用的实超高浓度伊红。
一般1---2%的水伊红好歹也要在里面待个30-60秒。
出来后最好下水洗下，要不搞的脱水的第一岗酒精都是红的，到时三缸脱水酒精出来后，片子周围到处都是红的-----------脏

郑

不是伊红的问题啊！因为伊红被后面的几道酒精脱色了，可能都是新换的酒精吧！

小文dd

你看看你的伊红如果是用无水酒精配的就不要过水了

花开花落

你的做法有好多错误！首先你的伊红是酒精溶性的，你从伊红出来不该用水洗！其次，低浓度的酒精有脱色的作用，你在九五酒精里的时间有点长！可以涮一下就出来！然后在无水里脱水吧！这是我的建议！还有就是如果感觉颜色确实还很淡，可以增加伊红的浓度！

liujun0304

支持花开花落的说法！
还有可以延长伊红的时间。我做的是乳腺组织，一般在25秒到30秒，
如果伊红过了，可在95酒精中改变时间来控制！

liujun0304

哦
小鼠的脑组织我也做过
伊红25秒
还可以可以自己试试！

iamyueyueyue

加长伊红的时间试一试