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冰冻切片中的问题

冰冻切片中的问题

丁老师:您好!
  我用冰冻切片作间接免疫荧光以检测我自己做的多抗,反复作了7次均为阴性(包括别人惠赠的阳性对照)。刚才发现丁老师的方法和我参照的方法有所不同,我想请教一下:我是将组织切3至4微米,用风扇吹10分钟后,再加丙酮固定。您是将组织切下后,立即加甲醇固定。我不知道是否是这一步出了问题,而且请问冰冻切片是否需要吹干?冰冻切片到底要多厚,做间接免疫荧光才能做出来?
  望能答复为感。
  谢谢!
  我的e-mail是:hopetang@163.com

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冰冻切片中的问题

不要吹干。我不固定从冰箱内拿出直接放入缓冲液里也做过,效果也很好。4-5微米可以。

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冰冻切片中的问题

不能吹干,要及时固定

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