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请教:PAS染色中的头痛问题!

请教:PAS染色中的头痛问题!

        各位老师
                 您们好!向各位请教个问题。这几天配制雪夫试剂一直没有成功。方法是按照书本上的。碱性品红和偏重亚硫酸钠都是新买的。
               Shiff染液:将蒸馏水100ml煮沸后冷至80℃,加入0.5g的碱性品红,冷却后过滤,煮至50℃时加入1N的盐酸10ml,,冷却至25℃左右加入焦亚硫酸钠0.7g,黑暗中储存过夜,加活性碳1g,摇1分钟放置一会后过滤。
              1N盐酸现用现配:92ml水+8ml浓盐酸。
               自己分析了一下可能的原因:1、盐酸浓度不够。2、碱性品红过期。(我们买的是结晶状的,呈淡绿或者说墨绿稍微再淡点) 偏重亚硫酸钠为粉末状,有味道。
              从肾脏病理书上看到可以直接用亚硫酸钠配制,省掉了加盐酸和偏重亚硫酸钠的步骤。 请问各位老师有这样配制过吗?配制过程需要避光吗?迫切希望能够得到各位老师的指导。本人万分感谢 !
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引用:
原帖由 shanghainese 于 2008-12-2 13:36 发表

储存过夜一定要密封好,不然溶液里的二氧化硫跑了就配不好雪夫试剂。加活性碳1g,摇1分钟放置一会后过滤后的滤液应该是无色透明。如果显红色说明没配好。滴一滴无色透明的雪夫试剂到一盆水里。如果水由无 ...
唉又配了两次,照您老说的,可能是我们的盐酸的量的问题;可是有的又是按照摩尔浓度计算也同样能配制成功。想请教一下,当量浓度是不是和摩尔浓度有本质的区别!
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引用:
原帖由 shanghainese 于 2008-12-24 00:13 发表

您用的是多少浓度的盐酸?
浓盐酸好像都是37%的!
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前面去请教了当地的一位老师, 他们用的是 Shiff染液快速制法:碱性品红0.25克充分溶解于100ml蒸馏水中,加浓盐酸1ml.,搅拌一分钟,倒入装亚硫酸氢钠的1.5克的棕色瓶中,振荡3分钟,置于4度冰箱。立即可用。作用时间15到30分钟。该科室一直用这种方法配制多年。结果用我们的试剂原材料配,不行。看来是我们的试剂问题!
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引用:
原帖由 dingwei 于 2009-1-1 16:40 发表
这个方法是冷配法,效果也不错,但应该用偏重亚硫酸钠,而不是亚硫酸氢钠。
谢谢老丁 再试一试!
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回复 17# 的帖子

设备科帮忙购买的好像是北京的吧!
这东西应该是很好买的了!
最终结果:冷配法 效果不错!
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引用:
原帖由 histotechnology 于 2010-8-2 08:24 发表
首先碱性品红有三种,只有染料索引号是CI42500的是配制Shiff试剂的,其次是配好的Shiff试剂滴在甲醛中立即便色,说明Shiff试剂较好,如果不能立即变色说明试剂不好。
其实真不知道还有这一说,刚看了一下试剂瓶,也不知道是啥,不知道前辈能否指点一下!
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