guting2006

请教大家一下，今天做的免疫组化片子都掉光了，我用的是1mM EDTA（PH8.0）抗原修复液，配方为：EDTA 0.3722g 蒸馏水1000ml　用NaOH调节至PH8.0，急，谢谢。

shanghainese

用superfrost plus microscope slides 就不会掉片了。

guting2006

哦，那配方上没有问题吧？谢谢您了，是不是不用这种片子就是会掉啊？再次感谢。

fangdang

主要是组织片粘附和组织脱水的问题

shanghainese

引用:

原帖由 guting2006 于 2009-7-8 20:26 发表
哦，那配方上没有问题吧？谢谢您了，是不是不用这种片子就是会掉啊？再次感谢。

配方没错。最好再加一点Tween 20。

EDTA Buffer  (1mM EDTA, 0.05% Tween 20, pH 8.0):

      EDTA (Sigma, Cat# E-5134) ----------- 0.37 g

      Distilled water -------------------------- 1000 ml

      Mix to dissolve. Adjust pH to 8.0 using 1N NaOH. Then add 0.5 ml of Tween 20 and mix well. Store this solution at room temperature for 3 months or at 4 C for longer storage.

shanghainese

引用:

原帖由 fangdang 于 2009-7-9 11:21 发表
主要是组织片粘附和组织脱水的问题

同意 fangdang的看法。 组织脱水不好很容易掉片。

冰雪

如果固定的不是很好,也容易掉片

guting2006

谢谢大家，我回去再用好的片子试试

guting2006

还是掉光了，已经用了最好的片子了。会不会是PH值的问题啊？我用的PH试纸，有可能不是很准。谢谢

guting2006

还有，shanghainese老师，为什么要加吐温20呢？吐温20不是冲洗的吗？这样不是掉的更厉害了吗？