中中中

冰冻切片要不要固定过程？

所有的专业书都说冰冻切片要固定，但在实操工作中本人认为，固定并非十分必要。原因有：
固定时间太短，冰冻诊断时间总共30 分钟，切片和染色只有15分钟，诊断15分钟。而固定速度为8微米/每小时，有较果吗？。所以,冰冻切片不固定直接染色,可否？不各位前辈有否做过对比试验，是如何做的，可否节省这宝贵的5分钟给诊断。

[ 本帖最后由 中中中 于 2009-9-8 13:49 编辑 ]

Tony

固定后染色效果会好些

jiaguotao

“可否节省宝贵的5分钟给诊断”？
5分钟？宝贵？
为了5分钟，你如果制作切片不合格，出了事情，就不止5分钟甚至50天能解决的了！
宝贵不宝贵，不是区区5分钟所能决定的，碰到疑难冰冻，切片诊断困难，你就是给他节省好几个5分钟，也未必能够发出很明确的结果，何来“宝贵”二字？
不能因小失大，此事咱们技术员以制作优质的冰冻切片为重，时间是越短越好，当然更不能偷工减料！固定与不固定在镜下的对比不是很明显，但是实践工作中有很多事情要碰到地！
脱片，自溶，是不可避免的！
那么是不是需要固定呢？
不言而喻！

中中中

引用:

原帖由 jiaguotao 于 2009-9-9 17:55 发表
“可否节省宝贵的5分钟给诊断”？
5分钟？宝贵？
为了5分钟，你如果制作切片不合格，出了事情，就不止5分钟甚至50天能解决的了！
宝贵不宝贵，不是区区5分钟所能决定的，碰到疑难冰冻，切片诊断困难，你就是给他节 ...

言重了，一切的尝试当然是要在可控的范围内进行，并须要有大量的数据支持，我们尝试了几例肌瘤的，不固定染色较果好明显优于固定的切片，也没见到细胞结构的明显破坏，可能是因为，暴露在空气中的时间足够短吧，但实验的病例不多，不知前辈可有尝试。 有实验才有发言权。

再者我认为技术与诊断不应各自为政，相互推诿。不知兄然否？。

组织固定的目的是防止自溶和变性，如果时间短到组织来不及自溶和变性，然则固定又有何意义?.请大家商榷。

[ 本帖最后由 中中中 于 2009-9-9 18:51 编辑 ]

6504339

不 怕一万就怕万一！

中中中

[ 本帖最后由 中中中 于 2009-9-13 17:50 编辑 ]

郑

固定的作用有:1防止组织自溶和变性;使组织定性定形;2固定有媒染的作用可使组织产生不同的折光率;3不固定的组织细胞遇水会变性

dingwei

引用:

原帖由 中中中 于 2009-9-8 13:47 发表
冰冻切片要不要固定过程？

所有的专业书都说冰冻切片要固定，但在实操工作中本人认为，固定并非十分必要。原因有：
固定时间太短，冰冻诊断时间总共30 分钟，切片和染色只有15分钟，诊断15分钟。而固定速度为8微 ...

冰冻切片当然要固定。固定就是要保证组织的形态和成份，主要看核的结构，染色质要清晰可见。
只是你的操作本身就非常错误，所以感觉不出固定的效果。
冰冻切好片应该立即把切片放入甲醇、95%酒精或丙酮等固定液中固定。而不是在空气中干燥后再固定。空气中干燥后的细胞核退变，成毛玻璃样，看不清染色质。
固定时间其实只要10-20秒，根本不需要5分钟。

jiaguotao

我只是记得上学的时候应该固定，实习的时候应该固定，上班了还在固定！
必须的，以后当别人问的时候，还是告诉他们要固定，而且必须及时！

中中中

试试吧，或许还会发现青霉素。