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苏木素配制

苏木素配制

各位前辈,晚辈初来乍到最近要做细胞免疫化学,自己买了sigma公司的苏木素,但是不知道怎么配制,因为不是这个专业的所以有点困惑,希望各位前辈给予解答,谢谢!

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Harris配方
苏木素--------------------------1g
硫酸铝钾-----------------------20g
无水乙醇-----------------------10mL
蒸馏水--------------------------200mL
氧化汞--------------------------0.5g
先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把硫酸铝钾放入蒸馏水,加热溶解,再加入苏木素,煮沸2分钟,缓慢加入氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以5%的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定;以每天100张片的量,可使用半个月左右。

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Harris苏木素标准配置

苏木素……1g
无水酒精……10ml
硫酸铝钾……20g
蒸馏水……200ml
氧化汞……0.5g
先将苏木素溶于无水酒精中,加热溶解,另将硫酸铝钾和蒸馏水放入较大的三角烧瓶中加温并搅拌,待全部溶解后,再倒入苏木素酒精溶液,混合后煮沸1分钟,稍冷却,慢慢加入氧化汞0.5g,改用小火加温,当染液变成紫红色时,将烧瓶浸入冷水中,使染液迅速冷却。冷却后过滤即可使用,使用前每100ml加冰醋酸4ml。(注:本人认为每100ml加冰醋酸4-5滴即可!烧瓶也可以换为其他适合的,以免烧瓶浸入冷水中炸裂!)
染色时间为3-10分钟,保存时间为一年。

[ 本帖最后由 xkj2797xkj 于 2011-6-16 22:34 编辑 ]
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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看起来有点复杂

谢谢你们!

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我们现在用的是加甘油的那种。。。 染的还行。。

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