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学习到的苏木素配制方法中出现的问题,希望得到老师们的指点!!

学习到的苏木素配制方法中出现的问题,希望得到老师们的指点!!

我想向各位老师请教下,
我科室以前是用harris苏木素,即苏木素1g,无水酒精10ml,硫酸铝钾20g,蒸馏水200ml和氧化汞0.5g,

方法不错,但不知道是不是药品本身的问题,效果没有刚进单位时的好,以前可以用两个月的,现在只能用一个月就得更换,

还有可能我比较少配置,现在仍没有很好的掌握火候,常常在放入氧化汞后等到试剂变深蓝色,用玻棒于纸张中试过够蓝才敢停火冷水冷却,这样就导致试剂可以用但是过氧化了,寿命不长久,别人配置的可以用一个多月,我的就只能勉勉强强一个月,有时候甚至不上色,明显过氧化了;但这个方法沉淀少,我们科基本等杂质沉淀,不过滤就直接用了,小心点,没有任何问题,配制步骤方便,少了过滤;
后来我去上级医院学习回来,用那边医院的配方,

就是苏木素1g,无水酒精10ml,硫酸铝钾20g。蒸馏水100ml和氧化汞0.25g,冰醋酸5ml;

这个方法比原来的方法容易配置,我也配置了两次,就这这个方法必须要过滤,还有就是火候问题,

第一次有老技术员在旁边帮忙, 加入氧化汞后上火沸腾,试剂从紫红色变成了蓝色,用纸张试过,颜色很深,然后停火冷水冷却,摇晃瓶壁可以看到沉淀产生了,试剂也很黏瓶壁,可以认定一定能上色,第二天在试剂上见到了氧化膜,试剂也从蓝色变回了紫红色,沉淀很多,过滤后染片颜色不错,但是我们也只是坚持了一个月,之后再想加冰醋酸也没有用了;但上色快,我们这50秒颜色就很深了;

第二次我是自己配置的,同时方法,但是在加入氧化汞后搅拌沸腾,试剂都是紫红色的,没有变成蓝色过,并且用纸试颜色也不深,还是煮了1min才好点,然后停火冷水冷却,

摇晃瓶壁,试剂无法粘附瓶壁,据说这样可能会使组织无法上色,或易脱色,也基本没有什么沉淀,然后第二天要过滤了,再看,没有出现氧化膜,有沉淀,但比第一次的少,试剂仍是无法粘附瓶壁,沉淀呈现透明大颗粒结晶状,感觉和第一次出现的沉淀不大一样,当时我没注意到,失误了,

现在我把第二次的试剂用于冰冻染色,颜色上色不错,但感觉没有第一次配制的容易上色,基本需要1分钟时间,但也没有脱色现象!!问过看片医生都说还可以!

注:1。上面两种方法我都没有放入冰醋酸,我们科认为冰醋酸对保存片子不利,容易使片子褪色,所以基本上是能不用就不用!!

2。配制时我们都是用透明三角玻璃瓶,这样对颜色变化,试剂是否溶解充分能明确的观察到!!

    我想请问各位老师,我的两次配制方法,有哪些不足,还有火候方面,我实在是搞不懂,到底到什么程度最好,从颜色可以判断出来吗?特别是就换了个人控制火候,产生的可见效果就相差这么大,我的两次配制,哪种的火候更好,或是是不是都已经过氧化了,我最怕过氧化了,用我们科室以前的方法就是容易过氧化造成失败@@

还有一点,学习配制这个试剂时我特地问过老师,他说应该一沸腾就停火冷却,当时不知道效果,后来配制时发现,若是这样,用纸试验,试剂颜色很淡,没有达到深蓝色的染色要求,所以之后又继续煮沸到用纸可以看出试剂变成深蓝色才敢停火冷水冷却,不知道是不是已经过氧化了!!

请老师帮我点评一下,谢谢!!

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都没有人看看吗?哪位老师给点意见嘛,我是新手,学了好东西也不知道哪里对哪里错,就希望老师们都评评,我好茫然哦

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就是苏木素1g,无水酒精10ml,硫酸铝钾20g。蒸馏水100ml和氧化汞0.25g,冰醋酸5ml;

这个方法比原来的方法容易配置,我也配置了两次,就这这个方法必须要过滤,还有就是火候问题,

第一次有老技术员在旁边帮忙, 加入氧化汞后上火沸腾,试剂从紫红色变成了蓝色,用纸张试过,颜色很深,然后停火冷水冷却,摇晃瓶壁可以看到沉淀产生了,试剂也很黏瓶壁,可以认定一定能上色,第二天在试剂上见到了氧化膜,试剂也从蓝色变回了紫红色,沉淀很多,过滤后染片颜色不错,但是我们也只是坚持了一个月,之后再想加冰醋酸也没有用了;但上色快,我们这50秒颜色就很深了;

这个方法就是成功了。一个月你染了多少切片呢?染液以切片的数量算,不以时间算。比如:我的染液用了一年,可是只染100张切片,不属于耐用

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苏木素--------------------------1g
硫酸铝钾-----------------------20g
无水乙醇-----------------------10mL
蒸馏水--------------------------200mL
氧化汞--------------------------0.5g
先将苏木素溶于无水乙醇中,备用。把硫酸铝钾放入蒸馏水,加热溶解,再加入苏木素,煮沸2分钟,缓慢加入氧化汞,防止氧化过程中苏木素外溢,玻棒搅拌,然后,边搅拌边加入氧化汞。加完后,立即移至冰水中,加速其冷却,静置一夜后,过滤。用前以5%的比例加入冰醋酸。如配好后时间较长,冰醋酸的量可适当多加一点。冰醋酸的量,可直接影响苏木素的着色能力和清晰度。加少了,会造成核浆共染,背景不干净;加多了,核着色能力下降。此液可放置3月至半年左右,视气温而定。使用期要看染色的切片量来定;以每天100张片的量,可使用半个月左右。我们配一次就配5000ml的。

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你找找病理技术的书看看,我配的也是和书上一样,我们的苏木素染色特别好!时间也用的长!
(本观点纯属本人意见!仅供参考!)

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超级简单配制苏木精法:
1、苏木素2g,溶于无水乙醇30mL
2、硫酸铝钾-30g,溶于蒸馏水450mL,稍加热使其溶解,不用煮沸,
3、混合1、2,降温至室温
4、加入碘酸钠0.2g,搅拌2分钟,放置4-12小时
5、加入冰醋酸25ml,甘油25ml,即可用

优点:操作很简单,不用煮,不用过滤,前提是苏木精于硫酸铝钾的质量要好。
          没有严格控制时间的步骤,有空就做一两步,没空就放放,等会接着配,没问题的
          染色液着色快,用得久,不易产生沉淀与氧化膜
          一次可多配,分次使用。

[ 本帖最后由 王华 于 2011-5-6 21:05 编辑 ]

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呵呵,谢谢各位老师,前段时间考试,没得上来看看,又准备到我配置苏木素了,我一定试试看

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